原子力顯微鏡可以在大氣和液體環(huán)境下對(duì)各種材料納米區(qū)域的形貌和物理性質(zhì)進(jìn)行探測(cè)，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、納米功能材料、生物、化工、食品等研究領(lǐng)域中。不過與掃描電鏡、透射電鏡等常規(guī)形貌表征工具相比，AFM原子力顯微鏡似乎還不為部分師生所熟知。為此，本短文以分析測(cè)試中心現(xiàn)配置的原子力顯微鏡儀器為例，為初接觸AFM原子力顯微鏡的同學(xué)做一些簡單的介紹，重點(diǎn)是關(guān)于如何制備原子力顯微鏡待測(cè)樣品。

為了順利獲得形貌或力學(xué)、電學(xué)等性能的數(shù)據(jù)，樣品的準(zhǔn)備至關(guān)重要。AFM原子力顯微鏡屬于掃描探針型顯微鏡，探針在樣品表面掃描屬于touching（接觸）模式，不同于光學(xué)顯微鏡等的seeing（觀察）模式，所以制樣的一個(gè)基本的要求是：樣品要平整地固定在基底表面，否則掃描過程中樣品可能輕微移動(dòng)，導(dǎo)致掃描失敗或形貌失真。下面列舉幾種常見的樣品固定方法：

導(dǎo)電玻璃、金屬、聚合物薄膜等成型樣品，可以直接固定在基底上。常見的固定方法是采用雙面膠固定在樣品托上；測(cè)試電學(xué)性能時(shí)，需要用導(dǎo)電膠、銀漿等固定，以形成導(dǎo)電通道。

石墨烯等納米片，或其他粉末材料，可以超聲分散在水、乙醇等溶劑中，再滴加在云母片、硅片等平整基底上。云母片需要新鮮剝離*表面的一層，硅片需要預(yù)先進(jìn)行清洗（建議在乙醇中超聲清洗）。

特殊情況下，可以利用靜電力等加強(qiáng)樣品的固定。例如，通常情況下云母表面帶有負(fù)電荷，調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)溶液pH，使其帶有正電荷，這樣結(jié)合就比較牢固；而帶負(fù)電的DNA可以經(jīng)過硅烷化處理，連接到基底表面。

為了制備含雜質(zhì)的蛋白質(zhì)樣品或其他高濃度樣品，可以使用清洗步驟。以制備Aβ蛋白樣品為例，可以參考以下制樣過程。

第Y步：用移液槍取數(shù)微升蛋白溶液，滴加在云母表面上，靜置幾分鐘；

第E步：將云母片傾斜約45°角，用200微升超純水沖洗云母片表面。云母片底部可以放置無塵紙，這樣沖洗留下的水和多余樣品可以及時(shí)被吸干，不會(huì)回流到云母片表面。

第三步：自然晾干云母片，或者用氮?dú)廨p輕吹干表面。

在以上制樣過程中，移取樣品的量、靜置時(shí)間、沖洗用溶劑的類型和用量可以根據(jù)不同樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。該制樣方法可以有效去除蛋白中的鹽類或其他雜質(zhì)，對(duì)于高濃度或含有雜質(zhì)的其他樣品也有很好的借鑒意義。

以上是一些常規(guī)的制樣方法，供初次接觸原子力顯微鏡的師生參考。實(shí)際制樣過程中，樣品的分散、固定、成型方法是多樣的，特別是納米材料，容易團(tuán)聚，為了得到理想的形貌，需要多方嘗試制樣的方法。在實(shí)際測(cè)試過程中，需要多與測(cè)試的老師進(jìn)行溝通，并根據(jù)測(cè)試結(jié)果反饋和指導(dǎo)后續(xù)的制樣過程，在此就不一一介紹了。